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日期:2022-05-26瀏覽:829次
小鼠雜交瘤細胞;IE3A10C8E5培養(yǎng)步驟:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法三:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
1)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。棄培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入到凍存液中。
細胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白172抗體
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ICK抗體
肽酰tRNA水解酶ICT1抗體
alpha干擾素誘導蛋白27抗體
細胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白81抗體
Gamma干擾素誘導蛋白16抗體
異檸檬酸脫氫酶3 beta亞基抗體
干擾素誘導的三角形四肽重復蛋白1抗體
異檸檬酸脫氫酶gamma亞基抗體
Bipped B樣蛋白抗體
艾杜糖-2-硫酸酯酶抗體
α-L-艾杜糖苷酶抗體
細胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白122抗體
細胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白140抗體
細胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白20抗體
細胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白43抗體
細胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白80抗體
CD101抗體