γ干擾素elisa試劑盒是指用于盛放檢測化學(xué)成分、藥物殘留、病毒種類等化學(xué)試劑的盒子。干擾素試劑盒使用采用進口抗體包被,以確保實驗的重復(fù)性與可靠性。干擾素試劑盒吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體。適用于血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種標(biāo)本類型。
γ干擾素elisa試劑盒檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
2、酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
3、洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4、陰性對照孔每孔加入PBS50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl
5、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
6、洗板,同(4)。
7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液100μl。
8、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
9、洗板,同(4)。
10、每孔加TMB顯色液100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
11、每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應(yīng)。
12、分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,醉終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13、數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。